將已經(jīng)過(guò)濾并脫氣的流動(dòng)相注入儲液罐；用流動(dòng)相沖洗金屬過(guò)濾器，然后將過(guò)濾器浸入儲液罐的流動(dòng)相中；
將儲液罐放置在一定的高度，以避免由于搬運和其他操作人員的移動(dòng)而造成不必要的跌落；然后按以下順序依次啟動(dòng)高效液相色譜儀:泵→檢測器→高效液相色譜軟件→按預先計劃的方法設置軟件參數，如分析時(shí)間、檢測波長(cháng)、流速等；啟動(dòng)泵，運行5分鐘，主要是為了排除系統中的氣泡，結束后關(guān)閉所有排氣閥；然后按照預先計劃的速度，以固定的速率，如1mL/min左右，運行流動(dòng)相，走基線(xiàn)，直到基線(xiàn)平穩，就可以在計算機軟件上進(jìn)行監視；基線(xiàn)平穩后，在軟件中設置樣品的運行參數，如流速和分析時(shí)間等。分析時(shí)間會(huì )因樣品、流速、柱長(cháng)等因素變化；參數設置完畢后，將固定體積的樣品溶液注入進(jìn)樣閥，然后在軟件中啟動(dòng)注入命令，進(jìn)樣器中的樣品溶液就隨流動(dòng)相進(jìn)入色譜柱;
通過(guò)軟件監視各項讀數，當檢測器檢測到樣品所有峰值，停止運行并設置新的進(jìn)樣。在下一個(gè)樣品分析前，建議留出5-10分鐘，待流動(dòng)相通過(guò)色譜柱，以便清洗之前樣品的殘留物;確認基線(xiàn)穩定后，進(jìn)行下一次注射；分析結束后，先關(guān)閉檢測器，然后關(guān)閉泵，最后關(guān)閉軟件。(具體操作流程參照各自HPLC使用說(shuō)明)
